Benznidazole treatment decreases IL-6 levels in Trypanosoma cruzi-infected human adipocytes differentiated from adipose tissue-derived stem cells

BACKGROUND Trypanosoma cruzi, which causes Chagas disease (CD), is a versatile haemoparasite that uses several strategies to evade the host's immune response, including adipose tissue (AT), used as a reservoir of infection. As it is an effective barrier to parasite evasion, the effectiveness of the drug recommended for treating CD, Benznidazole (BZ), may be questionable. OBJECTIVE To this end, we evaluated the parasite load and immunomodulation caused by BZ treatment in the culture of adipocytes differentiated from human adipose tissue-derived stem cells (ADSC) infected with T. cruzi. METHODS The ADSC were subjected to adipogenic differentiation. We then carried out four cultures in which we infected the differentiated AT with trypomastigote forms of the Y strain of T. cruzi and treated them with BZ. After the incubation, the infected AT was subjected to quantitative polymerase chain reaction (qPCR) to quantify the parasite load and transmission electron microscopy (TEM) to verify the infection. The supernatant was collected to measure cytokines, chemokines, and adipokines. FINDINGS We found elevated secretion of IL-6, CXCL-10/IP-10, CCL2/MCP-1, CCL5/RANTES, and leptin in infected fat cells. However, treatment with BZ promoted a decrease in IL-6. MAIN CONCLUSION Therefore, we believe that BZ has a beneficial role as it reduces inflammation in infected fat cells.

Antifungal Activity, Phytochemical Characterization and Thermal Profile of Anadenanthera colubrina (Vell. ) Brenan

Objective: To investigate the antifungal potential of A. colubrina, and its phytochemical characteristics, thermal profile and toxicity. Material and Methods: To assess potential antifungal activity, the technique of microdilution was used with the determination of the Minimum Inhibitory Concentration and Minimum Fungicidal Concentration, using standard species of Candida and recent clinical isolates of Candida albicans. Analyses of action of the extract were performed on the wall and cell morphology of C. albicans, of the interactive effect between the plant extract and nystatin on C. albicans through the checkerboard method, and of growth kinetics. The phytochemical screening was determined by spectrophotometry. The thermal profile was traced with the determination of thermogravimetric curves (TG) and differential scanning calorimetry (DSC). The toxicity was evaluated by the method of hemolysis. Results: The extract of A. colubrina showed a fungistatic potential against all bacteria tested and it acted by modifying the cellular morphology of C. albicans. There was a synergism between nystatin and the plant extract (FIC=0.375), and 53.18% of total polyphenols were determined. The TG curve showed the occurrence of three steps of thermal decomposition. None of the tested concentrations became the effective cytotoxic concentration. Conclusion: Further studies should be conducted to understand the efficacy and the mechanisms of action involved in the antifungal activity of the plant extract of A. colubrina in order to produce a new drug for the treatment of oral candidiasis.

Avaliação dos efeitos do inibidor de fosfodiesterase-5 (sildenafil) sobre células de Leydig e espermatozóides de camundongos / Assess the effects of phosphodiesterase-5 inhibitor (sildenafil) on Leydig cells and sperm of mice

O inibidor de fosfodiesterase-5 (PDE5), Sildenafil, é uma nova abordagem de tratamento oral para a hipertensão pulmonar. O esquema terapêutico envolve a administração de doseselevadas diariamente e, até o momento, se desconhece a ação desta droga sobre células germinativas. Uma vez que as células de Leydig e células peritubulares apresentam a PDE5, este estudo foi conduzido para investigar os efeitos do tratamento crônico com Sildenafil sobre as células de Leydig e espermatozóides de camundongos. Após o ensaio experimental, células de Leydig e espermatozóides foram analisados por procedimentos morfológicos, imunocitoquímicos e moleculares, e a testosterona no soro foi avaliada por radioimunoensaio.Inúmeras alterações foram observadas após o tratamento. As células de Leydig apresentaram modificações ultra-estruturais, tais como REL vesicular, grandes vacúolos distribuídos nocitoplasma, gotículas de lipídio claras, mitocôndrias dilatadas e círculos concêntricos de REL com vesículas na periferia, que são características típicas de células secretoras de esteróidesativadas. Os espermatozóides apresentaram mitocôndrias vacuolizadas. Um aumento na expressão da StAR, P450scc, testosterona, GCs, PKA e PKGI foi detectado nas células de Leydig. As sintases de óxido nítrico não foram detectadas nas células de Leydig pela técnica de western blot. Nos espermatozóides, a imunocitoquímica revelou uma diminuição na expressão da GCs e PKA, mas nenhuma alteração na marcação foi observada para a PKG.Nenhuma mudança significativa foi observada nos parâmetros de motilidade, viabilidade, integridade de acrossoma e DNA de espermatozóides. Adicionalmente, os níveis de testosterona no soro tornaram-se aumentados após quatro semanas de tratamento. Os resultados do presente estudo são consistentes com a hipótese de que a acumulação de GMPc, pela inibição da PDE5, e a ativação de suas vias dependentes estariam envolvidas na estimulação da biossíntese de androgênio...

Caracterização do efeito da dietilcarbazina (DEC) sobre a espermatogênese de camundongos / Characterization of the effect of the diethylcarbazine (DEC) on spermatogenesis of mice

A dietilcarbamazina tem sido altamente efetiva contra filariose linfática, mas seu efeito sobre células de vertebrados permanece controverso. Apesar de ter sido descrita sua ação sobre microtúbulos, a hipótese de que esta droga atue sobre a espermatogênese não havia sido testada. Após o tratamento de camundongos Swiss com 200mg de DEC/kg durante doze dias, as análises ultraestruturais mostraram vacuolização das células de Sertoli e espermatogônias com características morfológicas de apoptose, como condensação do citoplasma e aumento da densidade cromossomal. Algumas espermátides apresentaram mitocôndrias vacuoladas, as quais estavam desorganizadas em relação ao eixo microtubular do flagelo. Além disso, as células de Leydig mostraram numerosas gotículas de lipídio distribuídas no citoplasma, corpos multivesiculares e círculos concêntricos gigantes de retículo endoplasmático liso, alguns dos quais englobando gotículas de lipídio. Algumas células de Leydig não apresentaram núcleo indicando um processo de esteatose. Baixas dosagens de DEC produziram alterações similares nas células de Leydig, entretanto seus efeitos foram diretamente proporcionais à concentração da droga. Os níveis de testosterona no soro foram significativamente menores no grupo tratado com 200mg de DEC/kg quando comparados com o controle. Entretanto, nenhuma mudança significante foi observada nas taxas de gravidez e no número de filhotes quando machos tratados com DEC acasalaram com fêmeas não tratadas, nas doses estudadas. Os resultados do presente estudo indicam que a DEC apresenta um importante efeito sobre a morfologia testicular e esteroidogênese de camundongos provavelmente por afetar tubulina e/ou complexo de microtúbulos. Porém, os presentes dados não excluem a possibilidade desta droga atuar diretamente sobre as vias enzimáticas hormonais.